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疏水層析填料

疏水作用層析是根據分子表面疏水性不同來分離生物大分子的一種方法。蛋白質和多肽等生物大分子的表面常常暴露着一些疏水性基團,我們把這些疏水性基團稱爲疏水補丁,疏水補丁可以與疏水性層析介質發生疏水性相互作用而結合。不同的分子由於疏水性不同,它們與疏水性層析介質之間的疏水性作用力強弱不同,疏水作用層析就是依據這一原理分離純化蛋白質和多肽等生物大分子的。

選擇疏水作用層析介質的關鍵在於選擇合適的疏水強弱的配基,弱蛋白質的疏水性較強就需要選擇較弱的疏水介質,反之亦然,爲了增強蛋白質和疏水介質的結合需要在緩衝液中加入一定量的鹽(通常是硫酸銨)。弱蛋白質本身疏水性較強,就不需要加太多的鹽,爲了提高分辨率可以選擇顆粒較小的疏水介質。

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產品名稱 規格 市場價 數量
HF6033 Phenyl Tanrose 6FF (High Sub),1L 登錄後查看
HF6032 Phenyl Tanrose 6FF (High Sub),500mL 登錄後查看
HF6031 Phenyl Tanrose 6FF (High Sub),100mL 登錄後查看
HF6030 Phenyl Tanrose 6FF (High Sub),25mL 登錄後查看
HF6043 Phenyl Tanrose 6HP,1L 登錄後查看
HF6042 Phenyl Tanrose 6HP,500mL 登錄後查看
HF6041 Phenyl Tanrose 6HP,100mL 登錄後查看
HF6040 Phenyl Tanrose 6HP,25mL 登錄後查看
HF6023 Phenyl Tanrose 6FF (Low Sub),1L 登錄後查看
HF6022 Phenyl Tanrose 6FF (Low Sub),500mL 登錄後查看
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影響疏水層析的因素

     *蛋白質的疏水性強弱取決於其表面疏水基團的分佈。

     *鹽的種類及濃度,組成緩衝液中鹽的某些離子對蛋白質的構象有穩定作用,如 SO42- 可提高蛋白結構的穩定性,使蛋白的溶解度下降,對蛋白有鹽析效應,使蛋白同配基間疏水作用增強。還有些離子對於蛋白質構象具有不穩定作用,如 Cl-、Ca2+ 可增加蛋白質的溶解度,這類離子洗脫能力較強。鹽析和鹽溶的特性可作爲選擇疏水介質平衡和洗脫條件的依據,常用的疏水配基的疏水性強弱和疏水作用離子排列如下:

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*疏水層析過程中,溫度升高,疏水作用增強,有利於提高層析柱的分離度,但對於生物活性物質來說,高溫條件會使其變性失活,因此疏水層析通常在常溫或者低溫中進行,建議維持室溫。

     *疏水層析流動相的PH通常爲中性的磷酸鹽緩衝液。蛋白質同疏水基團的作用力隨PH升高而降低,因爲蛋白質的酸性基團隨PH升高所帶電荷逐漸增多,親水性增強。但在疏水層析中通常不採用改變溶液的PH來改變蛋白質的疏水性。

Phenyl/Butyl/Octyl/Butyl-S Tanrose FF 快流速瓊脂糖基架疏水層析介質

     Phenyl Tanrose 6FF 屬於芳香族疏水介質,疏水性最強。根據配基取代程度不同分爲:高取代(High Sub簡稱HS)和低取代(Low Sub簡稱LS)兩種介質。苯基通過不帶電,化學性質穩定的醚鍵連接到瓊脂糖上。

     Butyl Tanrose 4FF 和Octyl Tanrose 4FF 這兩種介質屬於脂肪族疏水介質,Butyl Tanrose 4FF 配基爲丁基,Octyl Tanrose 4FF 配基爲辛基:這兩種配基通過不帶電且化學穩定性的醚鍵同高度交聯的瓊脂糖偶聯而成。

     Butyl-S Tanrose 6FF 是疏水性最弱的疏水介質,適合在較低鹽濃度條件下純化強疏水性分子,可去除脂肪類,脂蛋白,色素等,在酵母重組表達乙肝疫苗純化過程中發揮重要作用。

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