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去內毒素親和填料的常見問題解答

2021-05-27

內毒素親和填料 

內毒素是一種常見的蛋白污染物,它的存在使得蛋白的活性研究變得十分複雜,並且內毒素是一種對人類有害的化學物質,它能引起發熱、微循環障礙、內毒素休克及播散性血管內凝血等一系列不良症狀,因此,檢測和去除蛋白中的內毒素有着十分重要的意義。

月旭Endotoxin rem Tanrose 4FF 內毒素親和填料以自制的瓊脂糖凝膠爲基質、多佔菌素B爲配基,用於去除生物源蛋白類產品(包括多肽、抗體、多糖等)中的內毒素,但多佔菌素B只對部分內毒素有抑制作用,而不能抑制所有內毒素。

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技術參數

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常見問題解決方案

#01 內毒素去除效率低,應當怎麼做? 

①可能原因:樣品pH值不在內毒素結合範圍。

解決方法:用0.1M NaOH或0.1M HCl調節pH至7-8。 

②可能原因:樣品與填料接觸時間短。

解決方法:降低流速,增加樣品接觸時間。

③可能原因:檢測系統被內毒素污染。

解決方法:確保所有試驗用品均爲無熱源產品。

④可能原因:內毒素與目的蛋白結合較強

解決方法:優化樣品pH,使樣品能夠與內毒素分離。

#02 樣品被污染,應當怎麼做? 

①可能原因:該填料純化過其他樣品。

解決方法:增加接觸時間;不要用使用過的填料來去除不同樣品的內毒素。

#03 樣品回收率低,應當怎麼做?

①可能原因:樣品非特異性吸附在填料上。

解決方法:增加樣品和平衡液中的NaCl濃度。 

②可能原因:目的蛋白與內毒素結合一起被去除。

解決方法:優化樣品pH,使樣品與內毒素分離。

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